LC-MS/MS を使用して胆汁酸を測定する場合、いくつかの分析上の課題があります。

胆汁酸は多様な構造と特性を持つ複雑な分子種であるため、その分析は複雑です。胆汁酸は、遊離胆汁酸、抱合型胆汁酸（グリシンまたはタウリンを含む）、硫酸抱合型胆汁酸またはグルクロン酸抱合型胆汁酸など、さまざまな形で存在します。この構造の多様性に対応するためには、包括的な検出と定量を確実にするための慎重な方メソッドの開発が必要です。

重要な考慮事項は次のとおりです:

胆汁酸にはいくつかの重要な生物学的機能があります。

胆汁酸は腸の健康やマイクロバイオームの研究と関連付けられることが多いですが、人間の生理機能、健康、病気においても多面的な役割を果たしています。これらの多様な分子は、がん研究、医薬品開発、心臓血管の健康、栄養、肥満、エクスポソミクスなどにおいて幅広い影響を及ぼすため、現在も研究が進められています。 胆汁酸に対する幅広い関心は、さまざまな生物学的プロセスにおけるその中心的な役割と、治療標的およびバイオマーカーとしての可能性に由来しています。 胆汁酸研究の学際的な性質は、その重要性を強調し、複数の科学領域にわたる共同の取り組みを推進します。

ヒト血漿中の胆汁酸を包括的に検出し定量するための 2 つの異なる標的戦略があります。

トリプル四重極型質量分析Sベースのアプローチは、高分解能のクロマトグラフィー分離と内部標準戦略を使用して高感度の胆汁酸定量を提供できます。Baylor College of Medicine and Texas Children's Hospital Microbiome CenterのThomas Horvath氏は、いくつかの同重体種を含む一連の胆汁酸のベースライン分離を提供するハメソッドスループット法を開発しました。この技術的に要求の厳しいアッセイメソッドのパラメータと化合物のイオン化を完全に最適化するには、個々の胆汁酸異性体の使用が必要でした。 検証された方法の詳細については、こちらをご覧ください。

高分解能質量分析法 (HRMS) に基づくアプローチは、以下の方法でより包括的な定量を行い、内因性胆汁酸の定量に十分な感度を提供することもできます。

電子励起解離 (EAD) などの新しいフラグメンテーション戦略の追加により、ヒト血漿中の胆汁酸異性体を区別するのに役立ち、大規模なクロマトグラフィー分離や面倒な方法開発の必要性がなくなります。

胆汁酸異性体の正確な定量を通じて胆汁代謝を理解することは、代謝障害から新しい治療法の開発に至るまで、前例のないメタボロミクスの洞察への道を開きます。